YY/T 0127. 11-2001 牙科學(xué)用于口腔的醫(yī)療器械生物相容性臨床前評價 第2單元:口腔材料生物試驗(yàn)方法蓋 髓試驗(yàn)（完整版）
YY/T 0127. 11-2001.Dentistry-- -Preclinical evaluation of biocompatibility of medical devices used in dentistry-Part 2: Biological evaluation test method of dental materials-Pulp capping test.
7.2牙齒預(yù)備
7.2.1用合適的麻醉劑對動物實(shí)行全身麻醉。去除牙面所有的牙石及菌斑。用1%碘酒,75%乙醇消毒口周。用3%(V/V)過氧化氫清潔牙冠表面、牙齦及口內(nèi)軟組織。放置橡皮障以隔離所用牙齒。用含碘汀或洗必泰的消毒劑消毒牙面及術(shù)區(qū)。
在水噴霧冷卻下,用鋒利鉆針在牙齒頰面或唇面頸部距釉牙骨質(zhì)界1mm處的釉質(zhì)部位制備V類洞。洞周均應(yīng)有牙釉質(zhì),并擴(kuò)展至牙齒近遠(yuǎn)中面,深達(dá)內(nèi)三分之一牙本質(zhì)或至洞底透出粉紅色。用無菌生理鹽水[0.9%(m/m)]沖洗窩洞，在窩洞中央,在無菌生理鹽水[0.9%(m/m)]沖洗下,仔細(xì)制備-直徑0.5mm~1.0mm露髓孔,且鉆針不能進(jìn)入牙髓組織內(nèi)(如可用直徑0.5mm的1/2號小球鉆在窩洞中央輕輕穿通髓腔)。用無菌生理鹽水徹底沖洗窩洞直至出血停止。用無菌棉球擦干洞壁。若廠家要求用其他沖洗劑或試劑進(jìn)行止血或用特殊的牙髓傷口處理方法,則按廠家要求操作。
注:若動物有明顯齦炎,應(yīng)在窩洞制備前1周去除結(jié)石及菌班,必要時可反復(fù)上述操作直至齦炎得到控制。
7.2.2 按隨機(jī)原則,每一試驗(yàn)周期用試驗(yàn)材料蓋髓至少7個窩洞,用對照材料蓋髓5個窩洞。在消毒調(diào)和板.上調(diào)和受試材料及對照材料.將材料放于露髓孔上,不施壓。用氧化鋅丁香酚或聚羧酸鋅水門汀墊底。最后可用粘接技術(shù)充填復(fù)合樹脂或玻璃離子水門汀。
8術(shù)后觀察
8.1在試驗(yàn)期中,定期觀察每只動物的反應(yīng),如飲食改變或口腔組織的炎癥或化膿。
8.2 切片制備
8.2.17d士2d及70d士5d后,用過量麻醉劑處死足夠數(shù)量的動物以獲得至少7顆含試驗(yàn)材料的牙齒。檢查充填體、牙齒及其支持組織,記錄任何異常細(xì)節(jié)。切下每一包含牙齒及其周圍軟硬支持組織的組織塊,用福爾馬林液或其他合適的固定劑固定。
若在處死動物切取組織塊之前,用固定劑進(jìn)行組織血管內(nèi)灌注,固定效果更好。
8.2.2固定后,X線片檢查每一組織塊,檢查是否發(fā)生影像改變。
8.2.3用合適的脫鈣劑[如10%(V/V)甲酸或pH7. 4的0. 5 mol/L乙二胺四乙酸(EDTA)溶液]。石蠟包埋,連續(xù)切片。通過牙齒唇(頰)舌面沿牙長軸過穿髓孔自冠部至根尖部進(jìn)行連續(xù)切片,切片厚5pm~10pm,間隔取片,H-E染色。必要時,用合適的細(xì)菌染色方法(如Brown&Brenn法)或其他檢查微漏的方法另取切片染色。
9牙髓評價
檢查切片,描述組織學(xué)特點(diǎn)。盲法檢查切片。對每一連續(xù)切片,詳細(xì)描述并記錄牙本質(zhì)、牙髓及根尖周組織的全部組織學(xué)特點(diǎn)(炎癥浸潤的程度和范圍、炎細(xì)胞類型、成牙本質(zhì)細(xì)胞的改變、充血、牙髓變性、牙髓壞死的性質(zhì)及范圍、牙本質(zhì)橋形成等),包括任何可能由窩洞制備所引起的組織學(xué)變化。按下列分級方法并分別對牙髓表層組織(成牙本質(zhì)細(xì)胞層、無細(xì)胞層及多細(xì)胞層)及深部牙髓組織的炎癥浸潤程度進(jìn)行分級。
