1. 生產(chǎn)工藝流程

本項目獸醫(yī)用診斷試劑研發(fā)階段及生產(chǎn)階段生產(chǎn)工藝完全一致，不同之處為研發(fā)階段為小規(guī)模，生產(chǎn)階段則按照研發(fā)階段研發(fā)出的指標(biāo)批量化生產(chǎn)。具體研發(fā)、生產(chǎn)工藝流程及產(chǎn)污節(jié)點(diǎn)如下所示。

根據(jù)研發(fā)及生產(chǎn)需要，領(lǐng)取所用的試劑、試劑瓶及瓶蓋等物料，復(fù)核品名、規(guī)格、批號、數(shù)量等。

1.1 磁珠包被

1. 緩沖液配制：使用脂肪酸甲酯磺酸鹽、封閉液、保存液配制緩沖液。
2. 清洗：取羧基磁珠到離心管中，固定到磁力架上進(jìn)行磁分離，移除上清液，重復(fù)用脂肪酸甲酯磺酸鹽溶液洗滌。
3. NHS 、EDC 溶液配制：N-羥基丁二酰亞胺用預(yù)冷的脂肪酸甲酯磺酸鹽溶解，配制NHS 溶液；1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺用預(yù)冷的脂肪酸甲酯磺酸鹽溶解，配制EDC 溶液。
4. 活化：向洗滌完的磁珠中加入脂肪酸甲酯磺酸鹽溶液和NHS 溶液，振蕩分散均勻，再加入 EDC 溶液，搖勻后固定在混勻器上室溫反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，磁分離，移除上清液，用脂肪酸甲酯磺酸鹽溶液磁分離洗滌。
5. 偶聯(lián)：上述磁珠用脂肪酸甲酯磺酸鹽溶液分散，加入需要偶聯(lián)的抗體溶液，然后補(bǔ)加脂肪酸甲酯磺酸鹽溶液至總體積為2mL ，搖勻后固定在混勻器上室溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，磁分離，移除上清液，用封閉液磁分離洗滌。
6. 封閉：加入封閉液，振蕩分散均勻后，固定在混勻器上反應(yīng)。
7. 保存：封閉完成的磁珠分散液磁分離后，移除上清液，用保存液磁分離洗滌，加入保存液，混勻，得到抗體偶聯(lián)磁珠分散液，2~8℃下保存。

1.2 吖啶標(biāo)記

1. 緩沖液配制：使用賴氨酸、磷酸緩沖液配制標(biāo)記終止緩沖液；使用磷酸緩沖液配制透析緩沖液；使用磷酸鹽緩沖液、氨基甲烷緩沖液、曲拉通X-100配制保存緩沖液。
2. 標(biāo)記：取外購抗體加在磷酸緩沖液（PB ）中，加吖啶酯混合，避光反應(yīng)12-24h 。隨后加終止緩沖液常溫放置10min ，然后置于透析緩沖液中過夜透析，用保存緩沖液收集保存。

1.3 試劑配制

將包被好的磁珠與標(biāo)記好的吖啶配成工作濃度后裝入試劑瓶，蓋上瓶蓋進(jìn)行保存。

1.4 貼標(biāo)

1. 領(lǐng)取標(biāo)簽和組分，并核對數(shù)量、批號、檢驗報告。
2. 調(diào)試貼標(biāo)機(jī)，確認(rèn)產(chǎn)品名稱、批號、有效期、生產(chǎn)日期。
3. 貼標(biāo)過程中剔除變形、打印不清、殘損的標(biāo)簽和組分。

1.5 成品檢驗

對成品進(jìn)行抽樣，按照技術(shù)要求或者標(biāo)準(zhǔn)檢驗合格后進(jìn)行成品入庫。

2. 生產(chǎn)設(shè)備

本項目主要儀器設(shè)備如下表所示。